实验动物分级及其标准:
根据实验动物、微生物控制标准,可将实验动物分为四级:
一级 普通动物(CV):
指微生物不受特殊控制的一般动物。需要排除人兽共患病的病原体和极少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病,在实验动物饲养和繁殖时,要采取一定措施,应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员,在不同的时间,用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验,都能获得几乎相同的结果)。
二级 清洁动物:
要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。
三级 无特殊病原体动物(SPF):
要求包含二级要求外,还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法,可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸汽喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。
四级 无菌动物(CF)或熟悉生物(GN):
无菌动物要求不带有任何用现有方法可检测出的微生物。熟悉生物要求在无菌动物体上植入一种或数种生物。
无菌、已知菌以及无特殊病原体动物需要在无菌或尽可能无菌的环境饲养,这种环境,目前国际上通用称为屏障环境,即用一道屏障把动物周围污染的环境隔开。
A. 隔离系统
是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统,用于饲养无菌动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度,但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。
B. 屏障系统
把1万-10万级左右的无菌洁净室作为饲养室,主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理,如淋浴、换贴身衣服等。
C. 半屏障系统
放宽对屏障系统中人及物出入房间的管理,平面组成大致与屏障系统相同。
D. 层流架系统
笼具放在洁净的水平层流空气中。常用于小规模饲养,但在一般房间进行饲养,操作和处理时有污染的危险性。可用于半屏障的补充。
E. 开放系统
是对人、物、空气等进出房间均不施行消除污染的系统,但通常要进行某种程度的清洁管理。
各种系统对实验动物环境指标的要求:
项目指标 |
开放系统(CV) |
简易屏障系统(CL) |
屏障系统(SPF) |
隔离系统(GF,GH) |
温度℃ |
18-29 |
18-29 |
18-29 |
18-29 |
日温差℃ |
8 |
3 |
3 |
3 |
相对湿度% |
40-70 |
40-70 |
40-70 |
40-70 |
换气次数(次/h) |
10-15 |
10-15 |
10-15 |
10-15 |
气流速度(m/s) |
0.18 |
0.18 |
0.18 |
0.18 |
压差 |
20-50 |
20-50 |
20-50 |
20-50 |
洁净度/级 |
10万 |
1万 |
1000 |
100 |
菌落数[个/(皿/h)] |
12 |
22 |
45 |
0.49 |
氨的质量浓度(mg/m3) |
14 |
14 |
14 |
14 |
噪声dB |
≤60 |
≤60 |
≤60 |
≤60 |
照度LX |
150-300 |
150-300 |
150-300 |
150-300 |
达到动物房环境指标的净化措施有:
A.空气净化系统
因为动物房是实验动物较长时间活动的场所,室内不可能在饲养条件下经常用熏蒸冲洗的方式灭菌,一般只能用药力较弱的消毒液擦洗,在这种情况下为了避免微生物侵染,保证空气净化则是首要条件。
B.全新风
防止交叉污染和除臭是两大难题,为此,净化空调系统大部分必须采用全新风方式。但由于净化系统换气次数大,又是全新风,所以能耗问题突出。
C.除臭
这不仅是设施对外部环境和工作人员所必须,而且也是实验动物本身所必须。因为室内除外界微生物污染外,动物本身排泄物和微生物二次转化成的氨、硫化氢、醇等气体,也是重要的污染物质,这些气体臭味愈浓烈,说明动物本身的洁净度愈低。目前还没有臭味允许值的定量资料和测定方法,但对于氨浓度应进行控制。除臭一般有增加新风和活性炭吸附两种方法。
动物房设计的基本要求:
(1)选址:僻静、卫生;
(2)布置:分为准备区、饲养区、实验区。要求人流、物流、动物流分开(单向流程);要求净化、灭菌、防虫;
(3)建筑:要求有洁净走廊、饲养室、污染走廊及其它各室;
(4)空调系统:有可控制的温度和湿度、气流速度和分布,有一定的换气量和气压;
(5) 照明:无窗动物房使用荧光灯,有窗动物房可安装玻璃窗,以滤去紫外线。要求12小时亮,12小时暗;
(6)供水:有饮用水和精制水。
动物房的设置:
根据不同种类和不同级别的实验动物的要求,建立相应设施和动物房、活动场所和相应的辅助用房。场址应选在保持安静、清洁、无不良外界影响的地方。
动物房必须光线充足、通风良好,地面整洁、不积水;顶棚、墙壁要易清洁、易消毒;外墙、屋顶、顶棚、门窗及通外面的管道等必须杜绝外界动物、蚊蝇及其它虫害钻入。室内温度控制在18-29度,相对湿度40-70%,噪音60分贝以内。
笼内动物密度不能太大,要有送风、排风、降温以及保温设备。必须有专用的排污、排水设施,防止病原扩散。各种笼具要定期消毒,垫料需经高温消毒并及时更换,使室内氨浓度在百万分之一(PPM)级以下。